近日，客户介绍自己在洗板操作过程遇到棘手问题，麻烦我司技术给她提供解决处理方法及建议。主要问题如下：
问题一：说明书上说洗板时要把孔里的水甩干，可我做的时候，无论我怎么拍，孔底还是有残留液体，请问这对试验有没有影响？或着有没有别的什么好的办法可以解决这个问题？
答：有一定的影响.尤其二抗反应后洗涤不好，会出现非特异.ELISA试验中洗涤是关键.尽可能甩干，而且尽量少拍，不一定每次都很干，但是后一次洗涤要尽量干。洗涤中另一个值得注意的是尽量不要出气泡。如果有条件的话，可用洗板机。
问题二：什么才叫封闭好了呢？有没有什么标准？
答：一般用1%BSA，150μl，37度，2h，如果还有非特异反应的话，可能有其他原因，比如加样时溅到了壁上或有气泡，洗涤不充分，二抗浓度过高，封闭物不合适以及反应条件是否得当等。
问题三：1%bsa,你是用什么稀释的，我用过pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀释，结果封闭的效果都不怎么明显，与不封闭差不多。
答：1%BSA用PBS稀释就可以了。还有就是要注意你的操作，背景高不一定是封闭的问题。
ELISA试剂盒洗板方法有以下两点
一、手工洗板方法
吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
二、自动洗板
如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。待检样本：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等。
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