对于ELISA实验新手们来说,一场实验下来还是有一定难度的,主要是因为还没有掌握一些实验中的小技巧,掌握了实验技巧之后,做ELISA实验会容易很多。今天就为大家分享ELISA实验的入门小技巧,一起来看看吧!
1、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
2、合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
3、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
4、要尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。
5、样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。
6、为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
7、未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。
8、ELISA实验中,加样后及时放入孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
9、剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
10、每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
11、手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孔中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
12、没有去离子水或双蒸水时,可以使用纯净水配制溶液,切勿使用自来水。
13、在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头。
14、吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡。
以上就是ELISA实验的一些入门小技巧,掌握了这些小技巧,做ELISA实验就会容易很多。
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