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    elisa试剂盒测定值与文献中相差太大怎么办
    Article Source:江苏酶标生物科技有限公司Jiangsu Meibiao Biotechnology Co., Ltd   add time:2022/3/4 8:17:12 CTR:1030

    (1)、生化测定主要目的是比较处理内和处理间该指标的变化。同时,要测定绝对值,往往是很可能甚至不可能的。因此,追求的不是绝对值而是相对值。

    (2)、用不同测定方法和不同测定条件下得到的测定值可能存在很大差异。因此,如果测定方法不同,同一样品的测定值通常是不可以直接比较的。这也是建议使用试剂盒测定的理由之一。因为不同作者用同一试剂盒测定的数据才是可以相互比较的。

    (3)、同一种材料,不同处理、不同发育状态和不同器官其生化指标可能发生很大变化。因此,能够直接用来比较的文献资料本来就不多。

    (4)、当然,话说回来,测定值如果与文献报道相差太大,首先应该检查单位是否一致,包括摩尔还是毫摩尔,是干重、鲜重还是蛋白质浓度,是分钟还是秒,等等。其次,检查计算是否有误?最后,如果相差不是数量级,通常是很正常的。


    elisa试剂盒反应五要素有哪些?

    (1)、引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

    (2)、引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

    (3)、避免引物内部出现二级结构,ELISA试剂盒避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

    (4)、引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

    (5)、引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

    (6)、引物中有或能加上合适的酶切位点, ELISA试剂盒被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

    (7)、引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。


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