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    ELISA实验需要哪些物品呢?
    Article Source:江苏酶标生物科技有限公司Jiangsu Meibiao Biotechnology Co., Ltd   add time:2022/9/13 15:41:28 CTR:2357

     ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。影响ELISA实验结果的因素很多,加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。下面就来向大家说一说ELISA实验需要哪些物品。

    、试剂 

    ①包被缓冲液(PH9.60.05M碳酸盐缓冲液):

        Na2CO3 1.59克

        NaHCO3 2.93克

        加蒸馏水至1000ml

    ②洗涤缓冲液(PH7.4PBS):0.15M

        KH2PO4 0.2克

        Na2HPO4·12H2O 2.9克

        NaCl 8.0克

        KCl 0.2克

        Tween-20 0.05% 0.5ml

        加蒸馏水至1000ml

    ③稀释液:

        牛血清白蛋白(BSA):0.1克

        加洗涤缓冲液至100ml

        或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。

    ④终止液(3M H2SO4):

        蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。

    ⑤底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸):

        0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml

    0.1M柠檬酸(19.2克/L)24.3ml

     加蒸馏水50ml。

    ⑥TMB(四甲基联苯胺)使用液:

        TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml

        底物缓冲液(PH5.5) 10ml

        0.75%H2O2 32μl

    ⑦ABTS使用液:

     ABTS 0.5mg

        底物缓冲液(PH5.5) 1ml

        3%H2O2 2μl

    ⑧抗原、抗体和酶标记抗体。

    ⑨正常人血清和阳性对照血清。

             

    二、器材

    ①聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。

    ②烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。

    ③4℃冰箱,37℃孵育箱。

    三、自备材

    ①蒸馏水。

    ②加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

    ③振荡器及磁力搅拌器等。

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