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    ELISA实验中血液样本的收集方法
    Article Source:江苏酶标生物科技有限公司   add time:2023/12/14 8:44:46 CTR:385

    血液样本是ELISA实验过程中很常见的样本。全血根据收集的条件,分成不抗凝收集和抗凝收集两种。不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清,抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。接下来我们就来具体介绍一下血清和血浆样本的收集方法。

    一、不抗凝收集血清

    1、无添加剂的干燥空管收集

    血管内壁均匀涂有防止挂壁的药剂(硅油)。它利用血液自然凝固的原理使血液凝固,等血清自然析出后,离心使用。主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、磷等)、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学检测。亦可直接用干燥EP管收集全血,充分静置使得红细胞充分自然凝固后,离心分离出血清待用或保存。

    2、用促凝管收集

    采血管内壁均匀涂有防止挂壁的硅油,同时添加了促凝剂。促凝剂能激活纤维蛋白酶,使可溶性纤维蛋白变成不可溶性的纤维蛋白聚体,进而形成稳定的纤维蛋白凝块,如果想快点出结果,可采用促凝管。一般静置半小时到1小时,直接离心分离出血清待用或保存,常用于急诊生化。

    3、含有分离胶及促凝剂的采血管收集

    管壁经过硅化处理,并涂有促凝剂可加速血液的凝固,缩短检验时间。管内加有分离胶,分离胶与PET管具有很好的亲和性,确实起到隔离作用,一般即使在普通离心机上,分离胶能将血液中的液体成分(血清)和固体成分(血细胞)彻底分开并积聚在试管中形成屏障。离心后血清中不产生油滴,主要用于血清生化(肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等)、电解质(血清钾、钠、氯、钙、磷等)、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学。

    二、抗凝收集血浆

    收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接离心分离血浆待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。

    1、肝素抗凝

    常用的抗凝剂,一般情况下对相关指标都不会有干扰,同时抗凝比例较大(抗凝剂:全血=1:30),对血液基本没有稀释影响。

    肝素是一种含有硫酸基团的粘多糖,带有强大的负电荷,具有加强抗凝血酶灭活丝氨酸蛋白酶的作用,从而阻止凝血酶的形成,并有阻止血小板聚集等多种抗凝作用。肝素管一般用于生化及血流变的检测,是电解质检测的最佳选择,检验血标本中的钠离子时,不能使用肝素钠,以免影响检测结果。也不能用于白细胞计数和分类,因肝素会引起白细胞聚集。

    2、EDTA抗凝

    乙二胺四乙酸是一种氨基多羧基酸,可以有效地鳌合血液中的钙离子,鳌合钙会将钙从反应点移走将阻止和终止内源性或外源性凝血过程,从而防止血液凝固,与其他抗凝剂比较而言,其对血球的凝集及血细胞的形态影响较小,故通常使用EDTA盐(2K、3K、2Na)作为抗凝剂。用于一般血液学检查,不能用于血凝、微量元素及PCR检查。

    由于EDTA会螯合重金属离子,用该抗凝剂的话,部分带有金属离子的大分子酶都会有大量损失,具体看客户测定的指标来选择,做血常规的话必须用EDTA抗凝。

    3、枸橼酸盐抗凝

    柠檬酸钠通过作用于血样中钙离子鳌合而起抗凝作用,国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐为3.2%或3.8%,抗凝剂与血比例为1:9,主要用于纤溶系统(凝血酶原时间、凝血酶时间、活化部分凝血酶时间、纤维蛋白原)。采血时应注意采足血量,以保证检验结果的准确性,采血后应立即轻轻颠倒混匀5-8次。

    以上就是ELISA实验中血液样本的常见收集方法,血清和血浆的收集方法多种多样,大家在实验过程中可以根据需要进行收集。

     

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