ELISA实验是一种灵敏度高,特异性强,重复性好的实验诊断方法,ELISA实验中有很多因素影响着实验结果,导致出现“花板”问题。为了避免“花板”问题的出现,降低检测的假阳性率,获得更理想的实验结果,首先我们在选择ELISA试剂时,应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、价格操作方便、省时的试剂。并在检验的过程中应采取下列措施:
(1)检测之前,加大离心转速,尽量延长时间,使血细胞和纤维蛋白充分沉淀,让血细胞与血清彻底分离。
(2)抽取样本时应抽出足够检验量的血液标本,选择无添加剂的真空试管。(3)血液标本应置于室温下1~2h,使血液凝固收缩,然后离心检测或让
血液过夜后再检测。这样才能使得血液充分收缩,让标本中的非特异性物质所致的假阳性率降至最低。
(4)加样时不能加入红细胞或纤维蛋白,要按照操作说明书去做,否则会影响实验结果。
(5)封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板”的出现。
(6)手工洗板时应注意液体被溅出或孔与孔之间的液体溢出,连成整体液面后产生“花板”。
(7)洗液的温度也会影响洗板的干净程度,尤其是冬天温度过低时容易出现“花板”问题。
(8)用洗板机洗板时应防止针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。
以上就是避免“花板”出现的措施,大家在实验过程中一定要多加注意。
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