血清是血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。关于血清保存冻融有以下几点:
1、需要长期保存的血清必须储存于-20℃冰箱。
2、4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。
3、由于血清结冰时体积会增加约10%,血清在冻入低温冰箱前必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
4、血清一般为无菌,因此不用再过滤除菌。
5、如发现血清有悬浮物,可将血清加入培养液内一起过滤,不能直接过滤血清。
6、血清解冻时需采用逐步解冻法,从低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室温待全部溶解后再分装。
7、在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀,注意不要产生气泡,不要产生沉淀。
8、不能直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
9、血清灭活是指56℃加热 30分钟处理已完全解冻的血清,加热过程中应该摇晃均匀,使血清中的补体成分灭活。
10、除非必须,商品化血清不需要灭活处理,热处理会造成血清沉淀物显著增多。
11、不能将血清在37℃放置超过2天,血清会变得浑浊,同时降解血清中的有效成分。
12、血清中的沉淀絮状物主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清质量,3000rpm离心 5分钟即可去除。
13、显微镜下小黑点是由于经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多,有些沉淀物在显微镜呈现为黑点,常误认为血清受污染。
14、通常,黑点不多时不会影响细胞生长。
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